Установить, является ли мужчина отцом ребёнка, можно различными методами. Но, самый достоверный результат даёт генетическая экспертиза ДНК. И хотя это не самая дешёвая процедура, цена ДНК теста на отцовство в СПБ в лаборатории Lab-DNK вполне доступна для большинства клиентов.
Забор материала для экспертизы обычно проводится в медицинском учреждении. Но, если нет возможности прибыть в лабораторию, то вполне возможно провести домашний ДНК тест на отцовство. Конечно, это не означает, что анализ будет получен на дому у заказчика. Просто, в домашних условиях будет собран биоматериал, а сама экспертиза проводится в лицензированной лаборатории.
Можно ли проверить ДНК на отцовство дома?
В домашних условиях проверить факт биологического родства не получится. Тестирование ДНК дома заключается в заборе буккального эпителия. Это можно сделать самостоятельно, используя специальный набор приспособлений и следуя инструкции.
Полученный материал отправляется в медицинскую лабораторию. Специалисты используют биологические данные отца и ребенка.
Для получения более достоверного результата и упрощения процедуры, дополнительно потребуются клетки матери. Чтобы результаты ДНК-теста являлись полноценным доказательством и использовались в дальнейшем, необходимо соблюсти определенную процедуру забора материала.
Рекомендуется учитывать такие нюансы, как:
- использование специального стерильного набора, полученного из медицинского центра;
- четкое следование прилагаемой инструкции во время забора материала;
- упаковывание результата в конверт и его отправление в лабораторию для исследования.
Набор для проведения теста ДНК в домашних условиях
Если процедура получения ДНК в домашних условиях не соблюдена (например, используется набор не из лаборатории или материал неверно упакован), ее результаты не будут являться достоверным доказательством для предъявления в суде. Чтобы не допустить подобных ошибок, необходимо более подробно изучить инструкцию по получению ДНК дома.
Головку ватной палочки категорически запрещено трогать руками. Ее необходимо взять за обрезанный конец. Во время процедуры делается минимум 10-12 движений вверх-вниз по внутренней поверхности щеки, плотно прижав головку палочки к слизистой оболочке.
Достоверность теста на отцовство по ДНК
Нить ДНК – это 46 хромосом, а именно главный носитель уникальной информации каждого отдельного человека. То есть, каждый человек имеет свои гены, они позволяют передавать данные в качестве сперматозоида следующему поколению. Клетки, которые содержат ДНК, хранят заложенную информацию о человеке при его зачатии и могут восстановить необходимый набор генетических признаков. Именно поэтому, нить ДНК используют для подтверждения или опровержения родства двух людей. Если ребенок был зачат от предполагаемого мужчины, то ему передается набор его генетических признаков, в результате чего хромосомы от двух биологических материалов (отца и ребенка) совпадают и тест выдает положительный результат. Поэтому достоверность данного теста высокая.
Провести тест ДНК для установления отцовства можно как после рождения ребенка, так и в период вынашивания плода, если у матери не стоит диагноз «Угроза выкидыша».
Как сделать тест в домашних условиях?
Процедура ДНК теста не занимает много времени (в среднем, 4-5 минут), является безопасной и безболезненной для взрослых и детей.
Сначала сотрудник медицинского центра присылает материалы для забора буккального эпителия, в этот комплект входит:
- подробная инструкция;
- стерильные палочки;
- разноцветные конверты.
Забор образцов производится при соблюдении следующих правил:
- подготовить материалы – ватные палочки и бумажные конверты в определенном количестве на каждого человека, участвующего в исследовании. Лучше заказать такой набор в лаборатории;
- правильно заполнить конверты. На каждом из них следует указать фамилию, имя, отчество, число, месяц и год рождения, степень родства, а также дату забора биоматериала. Если процедура является анонимной, то вместо Ф.И.О. указывается номер;
- взять мазок с внутренней поверхности щеки у всех проверяемых людей. Каждому потребуется две палочки, у которых следует срезать по одной ватной головке. Если один из проверяемых людей – уже родившийся ребенок, проверяться будет он и предполагаемый отец. Когда нужно провести тест на отцовство во время беременности женщины, требуется образец буккального эпителия мужчины (или иной вид образца) и кровь матери. В последнем случае проводить данную процедуру необходимо в специализированном учреждении;
- подержать палочку после мазка на открытом воздухе около 1 минуты для испарения излишней влаги;
- поместить образец в чистый конверт, внутреннюю поверхность которого нельзя задевать руками. Запечатывание конвертов производится строго с помощью клейкой полосы;
- полностью провести процедуру повторно, взяв мазок с другой стороны щеки;
- направить конверты с образцами в лабораторию.
Итак, в домашних условиях можно только получить биоматериал, дальнейшее его исследование проводится исключительно опытными экспертами, в стенах лаборатории.
Стоимость анализа
Проверка ДНК процедура довольно сложная, ее оказывают не все медицинские учреждения. Так как для ее проведения необходимо дорогостоящее оборудование и квалифицированные специалисты, ее цена не будет дешевой. Сегодня тест ДНК на установление родства может обойтись вам примерно в 5000-7000 рублей для каждого участника. Цена иногда может доходить и до 10000 рублей. Все зависит от региона проживания, медицинского центра куда вы обратились, а также срочности проведения процедуры. Стандартная цена составляет для получения результатов в течение 14 дней. Если вам необходимо узнать ответ срочно, за 2-3 дня, тогда придется заплатить две цены.
Когда вопрос установления отцовства поднимается принудительно через судебные органы, многие клиенты, придя в лабораторию, интересуются: «Возможно ли проведение экспертизы бесплатно?». Закон в этом случае возложил все издержки с судебным процессом на истца. Если в процессе установления отцовства через суд, будет доказан факт родства, от которого ответчик уклонялся, то суд может обязать его компенсировать растраты истца. [adsp-pro-1]
Точность генетического анализа
Достоверность и максимальная точность сделали ДНК-тесты столь популярной, а также незаменимой процедурой в сфере медицинских исследований и юридических доказательств. Генетическая экспертиза помогает без ошибок идентифицировать личность человека, установить степень родства или диагностировать сложные наследственные заболевания.
Точность теста ДНК зависит, в первую очередь, от степени глубины проведенного исследования и объема взятого материала. Для получения максимально точного результата, требуется анализировать больше фрагментов ДНК. Как уже говорилось выше, стандартный образец буккального эпителия берется со слизистой оболочки щеки.
Если невозможно получить буккальный эпителии, рекомендуется воспользоваться образцами другого происхождения:
- часть обрезанного ногтя;
- пятно крови или сперма;
- предметы личной гигиены или одежды.
Несмотря на нестандартность этих биоматериалов, есть шанс добиться не менее точного результата исследования ДНК. На правдивость теста также влияет уровень профессионализма специалиста и правильность получения образцов.
Согласно Международным стандартам 1991 года, вероятность исключений не должна быть ниже 99,99% для совокупности маркеров, необходимых для исследования ДНК-теста на отцовство.
В биологии также существует конкретная формулировка: точность теста зависит от частоты присутствия аллелей (различных форм одного и того же гена), передаваемых от отца ребенку.
Если биологическое родство подтверждается, его показатель рассчитывается следующим образом:
- сначала определяется индекс по каждому локусу. Общий показатель (CPI) – это произведение коэффициентов по всем локусам;
- далее вводится показатель вероятности в относительном выражении, который имеет значение 1,0: (1,0 + CPI).
Максимальная вероятность биологического родства при положительном результате составляет 99,999999%. Но, если в ходе анализа не выявлены совпадения фрагментов ДНК предполагаемого отца и ребенка, дается стопроцентный отрицательный результат.
Дорогие читатели! Для решения вашей проблемы прямо сейчас, получите бесплатную консультацию
— обратитесь к дежурному юристу в онлайн-чат справа или звоните по телефонам:
+7
— Москва и обл.
+7
— Санкт-Петербург и обл.
8
— Другие регионы РФ
Вам не нужно будет тратить свое время и нервы
— опытный юрист возмет решение всех ваших проблем на себя!
Расшифровка результатов
Тестирование проводится в нашей новой лаборатории на современном оборудовании.
Проведение теста и расшифровка результата обычно занимает от трех рабочих дней. Если речь идет о тесте на отцовство, то возможны два варианта результата: положительный результат при котором вероятность отцовства составляет 99,99% и отрицательный результат, который исключает вероятность отцовства на 100%.
Сколько по времени делается ДНК тест?
Как уже отмечалось выше, от скорости проведения процедуры, будет зависеть окончательная цена услуг. Так, согласно общему правилу, средняя длительность составляет три недели. Это время считается с момента получения биологических материалов. Ускоренный процесс можно выполнить за 3-5 дней, но за большую плату соответственно.
Важно! С момента сбора материала до передачи его в медицинский центр должно пройти не больше пяти суток, иначе образцы будут непригодными или значительно снизится точность результата.
Результаты анализа ДНК на отцовство
Расшифровка результатов исследования происходит в процентном соотношении. Так, если определенными цифрами зафиксировано, что участники являются родственниками, то вероятность отцовства будет равна 99,9 %. Такая цифра обусловлена тем, что при наличии у папы братьев близнецов их генетические наборы будут практически идентичными. В случае с отрицательными результатами указывается, что биологическое родство отсутствует на 100%.
По факту допускается проведение проверки анонимно, то есть заинтересованный родитель, проживая совместно с супругой и ребенком, может подготовить биологические материалы и передать их в клинику для проверки. На именах указываются ложные сведения, а ответ предоставляется удаленными каналами связи.
Что нужно для анализов
Наиболее частым вопросом перед проведением ДНК анализа на родство, является предмет исследуемого, то есть биологического материала человека, где содержится необходимая генетическая информации. Итак, в качестве материала для проведения генетической экспертизы от отца и ребенка может выступать следующее:
- кровь;
- слюна;
- сперма;
- волосы;
- ногти;
- сера из уха;
- пятна на ткани естественных выделений человека;
- зубная щетка;
- бритва;
- окурки;
- жевательная резинка.
Если проблем с забором материала нет, то сотрудники лаборатории советуют предоставлять слюну с внутренней стороны щек, так как данные клетки являются буккальным эпителием.
Задача специалиста – это исследовать сразу несколько фрагментов молекулы, которая содержит генетические данные, чтобы удостовериться несколько раз в подлинности результатов. Именно поэтому, лучше всего проводить данную процедуру в стенах лаборатории, чтобы разные внешние факторы не повлияли хоть на малейшую долю отклонения.
НОУ СОШ «ВЕНДА»
Наследственность, гены, ДНК… Кажется, эти слова уже давно перестали быть научными терминами, вошли в повседневную жизнь и знакомы теперь каждому старшекласснику, не говоря уж о студентах. Но никакой ДНК большинство из нас никогда не видело, хотя увидеть ее — дело вполне реальное даже в домашних условиях. В одной из генетических лабораторий на стене висит, к примеру, вот такая инструкция:
Как самому выделить ДНК.
1. Возьмите что-то, что содержит много ДНК. Например, фасоль (но можно свиную печень, рыбные молоки или редиску).
2. Положите в миксер около 100 мл (полстакана) этого продукта, добавьте 1/8 чайной ложки соли и 220 мл (стакан) холодной воды. Взбивайте в течение 20 секунд. Миксер «сварит» вам фасолево-клеточный суп.
3. Процедите смесь через ситечко или кусок марли или капрона (чулок вполне подойдет).
В полученную мякоть добавьте 1/6 от ее количества (это будет примерно 2 столовые ложки) жидкого моющего средства (для посуды, например) и хорошо размешайте. Оставьте на 8-10 минут.
4. Разлейте жидкость по стаканам или другим стеклянным посудинам, чтобы в каждой было заполнено не больше 1/3 объема.
5. Добавьте в каждую пробирку по чуть-чуть либо сока, выжатого из ананаса, либо раствора для контактных линз и осторожно встряхните, переворачивая и наклоняя пробирку (если будете трясти слишком рьяно, разломаете ДНК и ничего не увидите).
6. Наклоните пробирку и медленно влейте в нее немного этилового спирта, чтобы он образовал слой поверх фасолевой смеси. Лейте, пока спирта и смеси не окажется поровну. ДНК всплывет наверх в виде хлопьев.
7. Деревянной палочкой (карандашом) выловите их и рассмотрите под микроскопом.
Для научных работников эта инструкция — в какой-то степени шутка и никто из них ДНК таким способом не выделяет, а между тем если и вправду воспользоваться ею, то все получится! Выход ДНК будет, правда, невелик, а вещество — не особенно чистым, но увидеть в микроскоп длинные тонкие нити — кристаллы ДНК — вполне возможно.
Что же происходит с фасолью или свиной печенью в процессе описанных манипуляций и почему в конечном счете ДНК оказывается отделенной от всех остальных веществ, которых в клетке великое множество?
1.Выбор объекта.
ДНК, как известно, есть в каждой клетке, а значит, выделить ее можно из любой ткани — даже из костей животных, чешуи рыб или древесины, где клеток не так уж много по сравнению с объемом внеклеточного вещества.
Во всех тканях организма как животного, так и растения, ДНК, как правило, одинакова. Отличаются эти ткани тем, что в одних из них помимо вещества наследственности больше почти ничего нет (молоки селедки), а в других, таких, как костная ткань, содержание ДНК относительно невелико.
В общем, если перед исследователем не стоит какой-то специальной задачи, он старается выбрать для работы ткань, в которой мало межклеточного вещества и много самих клеток. Причем желательно, чтобы ткань легко распадалась на эти составляющие, а клетки не были перегружены белками (как мышечные), липидами (как жировые) или полисахаридами (как клетки мозга).
2. Дробим ткань на клетки.
В миксере ткань, из которой мы собираемся добыть вещество наследственности, распадается на отдельные клетки: чтобы механически разорвать связи между ними требуется, как правило, гораздо меньше усилий, чем для того, чтобы повредить саму клетку. И поскольку при нашем способе выделения ДНК требуются более или менее целые, неповрежденные клетки, ясно, что консервированный горошек, кукуруза или соленая селедка для такого эксперимента не годятся, — лучше уж взять что-нибудь свежезамороженное, если вы уверены, что продукт не размораживали в процессе хранения несколько раз.
А немного соли нужно добавить в раствор для того, чтобы клетки не полопались раньше времени: давление внутреннего содержимого на клеточную мембрану изнутри уравновешивают давлением соляного раствора снаружи.
3. Высвобождаем макромолекулу
Что касается фильтрации, то она нужна для того, чтобы механически удалить из клеточной суспензии всевозможные примеси, в том числе, крупные куски ткани — все равно те вещества, которыми мы собираемся обрабатывать смесь, не смогут проникнуть глубоко внутрь таких конгломератов, и для выделения ДНК они окажутся бесполезными.
А обработать полученные клетки следует, в первую очередь, каким-нибудь детергентом. Средство «Ферри», способное, согласно рекламе, легко отмыть самую жирную посуду, годится и для того, чтобы наделать больших дырок в липидной мембране как самой клетки, так и ее ядра. Если нет жидкого моющего средства, можно сделать концентрированный раствор стирального порошка — тоже подойдет. В результате такой обработки все клеточное содержимое вывалится наружу и окажется в растворе, который сделается при этом очень вязким, тягучим и существенно более прозрачным, чем была клеточная суспензия. Изменение консистенции раствора — верный знак того, что лизис прошел успешно.
4. Тут все ясно и без комментариев —
не наливайте слишком много раствора в емкость, туда предстоит еще много чего налить, к тому же, если смеси будет в избытке, ее будет трудно перемешать.
5. Освобождаемся от белков
Чего только нет в нашей смеси! Однако белков здесь — больше всего, причем именно они образуют самые прочные комплексы с ДНК. Существуют методики, когда белки удаляют из раствора в несколько этапов. Например, часть из них легко денатурирует и выпадает в осадок при добавлении концентрированных растворов солей. В лабораторных условиях такие приемы прекрасно работают, а от осадка исследователи освобождаются, помещая пробирки на несколько минут в центрифугу.
Мы сразу же перейдем к очистке ДНК от остаточных белков с помощью специальных ферментов, способных разрушать эти молекулы. Именно такие вещества содержит сок ананаса. Сами они — тоже белки, поэтому ананас, из которого выжимают сок, должен быть свежим: у ферментов нет ни малейшего шанса сохраниться неизменными в компоте или в консервированном продукте. Что же касается раствора для очистки линз, то если вы собираетесь использовать его — не забудьте положить таблетку для удаления белковых отложений! Сами по себе растворы для хранения контактных линз никаких активных веществ не содержат — иначе и нашим глазам не поздоровилось бы.
О том, что ферменты сработали, можно судить по уменьшению вязкости раствора. Если этого не происходит, поместите смесь в теплое место (примерно 37C) на полчаса, иногда может потребоваться добавить больше ананасового сока или раствора для очистки линз.
6. Осаждаем ДНК из раствора
Теперь ДНК плавает в растворе сама по себе. Белки больше не цепляются за нее, хотя обломков всевозможных молекул в смеси по-прежнему много. В лабораторных условиях эти ненужные фрагменты убирают, тщательно перемешивая раствор с фенолом и/или хлороформом. После центрифугирования внизу пробирки оказываются фенол и/или хлороформ с растворенными в них белками, а вверху — водная фаза, содержащая ДНК. Водную фазу собирают в отдельную пробирку и дальше работают уже с относительно чистым раствором.
За неимением центрифуги и органических растворителей, работа с которыми требует к тому же специальных мер безопасности, этот этап очистки в домашних условиях приходится пропустить и осаждать ДНК прямо из «грязного» раствора.
Заметим сразу — заменить этиловый спирт водкой или духами нельзя: если концентрация спирта будет низкой и упадет при смешивании с водной фазой до 60-65%, ДНК в кристаллическое состояние не перейдет. Отчасти именно по этой причине наливать спирт в пробирку с ДНК-содержащей смесью следует осторожно, наслаивая его сверху. Тогда нижние слои спирта частично смешаются с раствором ДНК, начнется процесс кристаллизации нуклеиновых кислот, и они всплывут на поверхность (где спирт более концентрированный) в виде хлопьев.
Если же налить спирт сверху не получится и все безнадежно перемешается, то при малом количестве этанола у вас вообще ничего не получится, а при большом начнет кристаллизоваться не только ДНК: в осадок выпадут и остатки белков, и кое-что еще из исходного содержимого клеток.
7. Что же мы получили? (см.рисунок ниже)
Чистые кристаллы ДНК похожи на клубки спутанных нитей, но не надо забывать, что вы видите именно кристаллы вещества, а не его макромолекулы, и сказать по их внешнему виду, какие гены содержит выделенная вами нуклеиновая кислота, конечно, невозможно. Чтобы узнать это, придется снова растворять ДНК. Впрочем, «прочесть» последовательность нуклеотидов в домашних условиях, увы, невозможно: для этого нужны не только специальные приборы, но и дорогие реактивы.
Однако если вы уже хорошо рассмотрели кристаллы и они успели подсохнуть, можете понаблюдать за тем, как ДНК растворяется. Она в начале набухает, становясь похожей на студенистую медузу, и лишь спустя несколько дней раствор делается однородным.
Процесс можно ускорить, если пробирку почаще встряхивать.
Желаю успехов начинающим генетикам и молекулярным биологам!
Материал подготовил: учитель биологии НОУ СОШ «ВЕНДА» Ледуховский Н.В.
